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巴中PCR實驗室標準四區(qū)分區(qū)法

時間:2025-12-19 15:09:41 點擊:32300次

各區(qū)工作流程必須嚴格遵循:試劑準備 → 標本制備 → 擴增 → 產物分析。

分區(qū)別稱核心功能核心風險與控制目標典型潔凈度/壓力要求
1. 試劑準備區(qū)前處理區(qū)配制、分裝PCR主反應混合液(不含模板)。存儲核心試劑。防止被模板或擴增產物污染。 這是最“干凈”的區(qū)域。正壓最高??諝鉂崈舳纫笞罡?,建議達到萬級(ISO 7) 或十萬級(ISO 8)。
2. 標本制備區(qū)樣品處理區(qū)臨床樣本的接收、登記、處理;核酸(DNA/RNA)的提取、純化、定量。主要污染源區(qū)(含模板)。 防止模板擴散至試劑區(qū),并防止擴增產物倒流入此區(qū)。相對于試劑區(qū)為負壓,相對擴增區(qū)為正壓。 是生物安全核心區(qū),需按生物安全二級(BSL-2)設計,排風需獨立。
3. 擴增區(qū)基因擴增區(qū)將制備好的核酸模板加入反應體系,進行PCR循環(huán)擴增。最大污染源區(qū)(產生大量擴增產物)。 必須確保擴增產物不擴散至前區(qū)。相對于標本區(qū)為負壓,相對產物區(qū)為正壓。 空氣需全排,嚴禁任何回風。
4. 產物分析區(qū)電泳區(qū)對擴增產物進行電泳、測序、雜交等開蓋分析操作。極高暴露風險區(qū)(操作含高濃度產物)。 防止產物氣溶膠擴散至其他任何區(qū)域。負壓最低(全實驗室最低)??諝獗仨?span style="font-weight: 600;">獨立直排,并建議經高效過濾器(HEPA)處理。

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